TRIS常用生物缓冲液体系之TE、TAE、TBE缓冲液
TRIS由于其广泛的用途和可配置多种缓冲液的作用当之无愧成为生物缓冲剂中的扛把子,TE、TAE、TBE缓冲液就是其中比较常见的几种,接下来我们就详细介绍一下这三种看着就很类似的生物缓冲液。
组成成分
TE缓冲液:由TRIS+EDTA按比例配制而成。
TAE缓冲液:由TRIS+EDTA+醋酸按比例配制而成。
TBE缓冲液:由TRIS+EDTA+硼酸按比例配制而成。
用途
TE缓冲液:多用于溶解剂或者保存剂,可用于DNA的稳定与存储,也用于灭活型病毒保存液中。
TAE缓冲液和TBE缓冲液:都是生物学中使用频繁的核酸电泳缓冲液,主要用于DNA琼脂糖凝胶电泳实验中。
TAE缓冲液和TBE缓冲液的选择
TEA缓冲液:在质量电泳大于13Kb的片段时分离效果最好,0.8%的琼脂糖凝胶中迁移速度更快,因此多用于回收DNA片段。其缺点也不容忽视,TEA的缓冲容量小,缓冲能力弱,并且不适合使用在长时间电泳实验中。
TBE缓冲液:缓冲能力强,电泳小于1Kb的片段时分离效果最好,在2%的琼脂糖凝胶上,迁移速度更快,且适合长时间的电泳实验、分辨率高是其优点。TBE中的硼酸是一种酶制剂,不适用于分离电泳的DNA酶切反应,硼酸也会影响DNA的回收率。另一点需要注意的是TBE浓溶液置放时间过长容易产生沉淀物,因此建议即配即用。
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