经典液相色谱的流动相靠重力缓慢流过色谱柱,因此固定相的粒径不能太小(约100微米~ 150微米)。将分离后的样品分阶段收集,然后进行分析,这使得经典的液相色谱法不仅分离效率低、分析速度慢,而且操作复杂。直到20世纪60年代才开发出粒径小于10μm的高效固定相,并采用高压输液泵和自动记录检测器,克服了经典液相色谱的缺点,发展成为高效液相色谱,又称高压液相色谱。
离子交换色谱法
离子交换色谱通常使用离子交换树脂作为固定相。一般来说,样品离子与固定相离子发生可逆交换,由于各组分离器的交换能力不同而实现色谱分离。
凝胶色谱
目前,凝胶色谱既适用于水溶液,也适用于有机溶剂。当使用的洗脱液为水溶液时,称为凝胶过滤层析,在生物学中应用广泛。当用有机溶剂作为洗脱剂时,称为凝胶渗透色谱,在高分子领域应用广泛。
液相色谱中使用的保留值、塔板数、塔板高度、分离度和选择性等基本概念与气相色谱中使用的基本概念一致。