抗原检测试剂
注册技术审查要点(试行)
本审评要点(试行)旨在指导注册申请人在(2019-nCoV)抗原检测试剂的产品设计、开发、验证和确认过程中，指导注册申请人对此类试剂注册申请资料的准备和撰写，也为技术审评部门对注册申请资料进行技术审评提供参考。
本综述(试行)的要点是(2019-nCoV)抗原检测试剂的一般要求。注册申请人应根据产品的具体特征确定内容是否适用。如果不能，应详细阐述理由和相应的科学依据，并根据产品的具体特点，对注册申请资料的内容进行丰富和细化。
本审查要点(试行)是注册申请人和审查人的指导性文件，但不包括注册审批涉及的行政事项，不作为法律强制执行。如果有其他能够满足相关法律法规要求的方法，可以采用，但需要提供详细的研究和验证材料。相关人员应在符合法律法规的前提下使用本审查点(试行)。
本次审查要点(试行)是在现行法规标准体系和当前认知水平下制定的。随着法规标准的不断完善和科学技术的不断发展，本次审查(试行)的相关内容也将适时进行调整。
一.适用范围
本审评点(试行)适用于(2019-nCoV)抗原检测试剂注册申请和注册变更申请。
二、注册审核要点
(1)监管信息
1.产品名称和分类代码
产品名称应符合《体外诊断试剂注册备案管理办法》(国家市场监督管理总局令第48号)及相关法律法规的要求，如(2019-nCoV)抗原检测试剂盒(免疫层析法)。根据体外诊断试剂分类规则，本品按第三类体外诊断试剂管理，分类代码为6840。
2.其他信息还包括产品清单、相关文件、申报前与监管机构的联系方式和沟通记录、符合性声明等文件。
(2)汇总信息
汇总信息主要包括概述、产品说明、预期用途、申报产品的上市历史及其他需要说明的内容。其中，产品说明应详细说明检测原理、产品主要研究成果的总结和评价，以及与同类和/或上一代产品的比较。与同类和/或上一代产品相比，申报产品与目前市场上已获批准的同类产品的主要区别，应从方法学、检验原理、产品主要性能等方面详细说明。
审查材料应符合《体外诊断试剂注册备案管理办法》(国家市场监督管理总局令第48号)和《关于公布体外诊断试剂注册申请材料及批准文件格式要求的公告》(2021年第122号)的要求。
(3)非临床数据
1.产品技术要求和检验报告
1.1产品技术要求
注册申请人应当在原料质量和生产工艺稳定的前提下，根据产品开发和预评价结果、国家标准、行业标准及相关文件，结合产品特点，按照《医疗器械产品技术要求编写指导原则》(2022年第8号)的要求进行编写。作为第三类体外诊断试剂，该类产品应附主要原料和生产工艺要求作为技术要求文本的附件。
如有适用的国家标准和行业标准，产品技术要求的相关要求不应低于相应的要求。
1.2产品检验报告
抗原检测试剂有国家标准的，技术要求应体现国家标准的相关要求，三批产品按国家标准进行检测。
2.分析性能研究
注册申请人应使用在符合质量管理体系的环境下生产的试剂盒进行所有分析性能研究，并提交详细信息，如具体的研究方法、测试计划、测试数据、统计分析等。
如果申报的产品适用于不同型号，则需要提交在不同型号上执行的信息。如果申报的产品包含不同的包装规格，需要对每个包装规格进行分析或验证。对于不同的样品类型，应提交相应的分析性能数据。
建议重点研究分离性能。
2.1样品稳定性
注册申请人应充分考虑实际使用过程中样品采集、加工、运输和保存的条件，对不同类型的样品分别进行稳定性评价并提交研究资料。内容包括建议的储存条件、储存溶液和运输条件(如涉及)等。如果保存溶液(取样溶液等。)需要在样品采集后添加的，应同时研究处理后样品的样品稳定性。
此外，如果样品经过灭活(如热灭活等。)用于检测，灭活前后临界值附近至少5个样品应进行灭活因子干扰验证，比较检测结果的差异。
2.2适用的样品类型
如果试剂适用于多种样本类型，应通过合理的方法确认每种样本类型的适用性。
2.3精度
对精密度指标的评价标准，如标准差或变异系数等，应做出合理的要求。精密度研究应使用临床样本，或使用病毒培养添加到阴性基质中。
要考虑操作、时间、操作者、仪器、试剂批次、位置等影响精密度的条件，设计合理的精密度试验方案进行评价。
设定一个合理的精度评估周期，例如，至少持续20天的测试。具体方案可参照绩效评估的相关文件进行。
用于精密度评价的临床样本应至少包含三个水平:阴性样本、临界阳性样本和(中度或强)阳性样本，并根据产品特性设定适当的精密度要求:
①阴性样品:待测物质浓度低于检出限或零浓度，阴性检出率应为100%(n≥20)。
②临界阳性样本:待测物质浓度略高于试剂盒的检测限，阳性检出率应≥95%(n≥20)。
③中/强阳性样品:供试品浓度为中到强阳性，阳性检出率为100%且变异系数小于等于15% (n ≥ 20)，或条带结果均匀。
2.4包容性
至少使用10份具有时间和地域特征的不同来源的临床样本或病毒培养液进行验证，验证内容应包括重复性、检出限等。提供了样品和浓度的确认方法和测试数据。样本应覆盖目前国内常见的突变株类型，以考察不同突变株的检测能力。
2.5检测极限
2.5.1检出限的确定
建议通过研究梯度稀释后的病毒来确定检测限。病毒稀释的每个梯度应重复3 ~ 5次，每次稀释应重复不少于20次。以阳性检出率为95%的病毒水平为检测限，用适当的方法确认抗原浓度。
应从不同来源或培养的病毒原液中选择三个有代表性的临床样本来确定检测限。
检测限的验证
至少选择3份具有时间和地域特征的疾病或临床样本(与检出限不同的样本)在检出限水平进行验证，阳性检出率应达到95%。
使用的稀释剂应与适用样品类型的基质一致，阴性样品可用于稀释。应提供详细的病毒滴度测定方法，并详细描述病毒样本的确认方法和验证结果。
2.6分析特异性
交叉反应的验证
①地方性人类(HKU1、OC43、NL63和229 e)；非典、中东呼吸综合征.
②H1N1(新H1N1流感病毒(2009年)，季节性H1N1流感病毒)，H3N2，H5N1，H7N9，乙型流感山形，维多利亚，副流感病毒ⅰ、ⅱ、ⅲ，呼吸道合胞病毒A、B，鼻病毒A、B、C，腺病毒1、2、3、4、5、7。
③支原体、衣原体、流感嗜血杆菌、链球菌、克雷伯氏菌、结核分枝杆菌、白色念珠菌。
提供用于交叉反应验证的病原体样本的来源、阴阳、种/型、浓度/效价确认等所有实验数据。建议在病原体的医学相关水平上验证交叉反应，例如105 pfu/mL或更高的病毒浓度。
④验证正常人样本不少于20个。
2.6.2内源性/外源性物质的干扰
建议对每种干扰物质的潜在浓度(“最差条件”)进行评估，并在病毒抗原的临界阳性水平进行干扰试验。
表1干扰试验的推荐物质
| 材料 | 有效成分 |
| 粘蛋白 | 纯化粘蛋白 |
| 血 | / |
| 抗病毒药物 | 干扰素-α、扎那米韦、利巴韦林、奥司他韦、帕拉米韦、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔。 |
| 抗生素 | 左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、美罗培南 |
| 全身抗菌药物 | 托普霉素 |
| 缓解过敏症状的药物 | 组胺 |
| 鼻喷剂或滴鼻剂 | 苯肾上腺素、羟甲唑啉和氯化钠(包括防腐剂) |
| 鼻用皮肤类固醇 | 倍氯米松、氟替卡松、曲安奈德、柴胡、莫米松和氟替卡松。 |
6.[样本要求]
说明样品采集、处理和保存的要求，包括采样要求、采集器要求、离心条件、运输条件、保存条件和有效期、冻融要求、预处理方法等。前期要核实相关内容。
7.[检查方法]
7.1检测环境:检测试剂和样品的复温要求等。
7.2试剂的配制方法、开封后试剂的使用方法等。
7.3样品稀释方法。
7.4测试条件:操作步骤、温度、时间和仪器条件。
7.5质量控制:操作步骤、质量控制结果的要求(检验有效性的判定)、不符合要求的质量控制结果的处理方法。
7.6正确的检验操作方法、程序和注意事项可以用图形形式显示出来。应特别注意操作温度和湿度条件以及读取结果的时间。
7.7特别说明检查操作中的注意事项。
8.[阳性判断值](如果适用)
明确阳性判定值，简述确定阳性判定值的试验方法。
9.[测试结果的解释]
描述测试结果的判断标准或计算方法。如果有灰色区域判断，应详细说明灰色区域样本的处理方法。建议结果的解释方法(如胶体金、荧光免疫层析等试剂)可以用图形的形式描述。
10.【测试方法的限制】
根据产品的预期用途、临床背景、检测方法和应用范围，说明可能存在的局限性。例如:
10.1本试剂盒的检测结果仅供临床参考，患者的临床诊断和治疗应结合其症状/体征、病史、其他实验室检查和治疗反应综合考虑。
10.2假阳性结果的可能性分析
如果样本在运输和处理过程中交叉污染，可能导致假阳性结果；
测试中使用的消耗品和设备的污染可能会导致假阳性结果。
10.3假阴性结果的可能性分析
不合理的样本采集、运输、保存和处理，样本中病原体含量低，可能导致假阴性结果；这种病原体的突变可能导致假阴性结果。
11.“产品性能指标”
简要描述以下绩效指标:
11.1内部参考物质的符合率。简要介绍了各企业标准物质的组成、来源和浓度梯度设置。
11.2检测限:简要介绍评价方法、使用的疾病或样品以及评价结果。
11.3总结包容性研究。
11.4总结精度的研究情况。
11.5分析特异性
11.5.1交叉反应:描述交叉反应验证的病原体种类以及有无交叉反应的浓度水平。
11.5.2干扰物质:描述已验证的干扰物质的种类以及有/无干扰反应的浓度水平。
11.6挂钩效应:总结验证高浓度挂钩效应。
11.7临床试验:简要介绍试验方法、受试者和样本、试验结果和结论等。