PCR实验室布局
一般的PCR实验室通常分为四个独立的工作区:试剂制备区、样品制备区、核酸扩增区和产物分析区。
在荧光定量PCR的检测方法中,定量PCR实验室通常分为试剂制备区、样品制备区、核酸扩增和产物分析区三个独立的工作区,即普通PCR实验室后两个区域合并。
为了避免交叉污染,进入每个工作区必须严格遵循单一方向,即只能从试剂制备区→样品制备区→核酸扩增区→产物分析区。
试剂储存和制备区]
该实验区的主要操作是储存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合物的制备。用于标本制备的试剂和材料应直接运送到该区域,不得经过其他区域。试剂原料必须存放在这个区域,并在这个区域配制成所需的储存试剂。
[标本制备区]
这方面的主要操作是保存临床标本、提取和储存核酸(RNA、DNA)以及在将它们加入扩增反应管和测量RNA时合成cDNA。
[反应混合物的制备和扩增以及扩增产物的分析区域]
该区域主要用于DNA或cDNA扩增和扩增片段的测定。此外,制备的DNA模板和合成cDNA(来自样品制备区)的添加和主反应混合物(来自试剂储存和制备区)到反应混合物中的制备也可以在该区域中进行。